УЧРЕДИТЕЛЬ: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Читинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Зарегистрирован в качестве
средства массовой информации
Федеральной службой по надзору
в сфере связи и массовых коммуникаций
Эл № ФС77-34784
от 24 декабря 2008 г.

В 2018 г. в запись о регистрации
внесены изменения и уточнения
Эл № ФС77-73212 от 02 июля 2018 г.
ISSN 1998-6173
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ТКАНЕЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАРОДОНТИТЕ У КРЫС

Резюме

Название статьиМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ТКАНЕЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАРОДОНТИТЕ У КРЫС
MORPHOLOGICAL AND IMMUNOLOGICAL CHANGES IN TISSUES DURING EXPERIMENTAL PARODONTITIS IN RATS
Категорияномер 1 за 2023 год (опубликован 04.04.2023)
ТипНаучная статья
Ключевые словаэкспериментальный пародонтит, цитокины, иммуногистохимия, ответ иммунной системы
experimental periodontitis, cytokines, immunohistochemistry, immune response
СкачатьСкачать статью
doi10.52485/19986173_2023_1_74
УДК616-092.4 : 616.311.4
Резюме

Цель исследования: оценить морфологические и иммуногистохимические параметры пародонта крысы в модели экспериментального пародонтита.

Материалы и методы исследования. Экспериментальный пародонтит формировали у самцов крыс породы Wistar в возрасте 18–20 недель и весом 200–300 г. Пародонтит моделировали путем отслойки десны концом копьевидного скальпеля (№ 11) в сочетании с инъекциями 10% раствора этилового спирта с 0,25% раствором новокаином в течении 7 дней. Воспалительный процесс оценивался морфологическими и гистологическими методами.

В сыворотке крови и гомогенате тканей пародонта определяли уровень цитокинов с помощью системы мультиплексного анализа (США). Гистологические срезы делали на уровне резцов обеих челюстей, окрашивали гематоксилин-эозином и иммуногистохимически кроличьими моноклональными антителами (SP7).

Статистическая обработка данных проводилась с использованием однофакторного дисперсионного анализа Крускал-Уолисса. Достоверность различий между группами (р) оценивали при помощи попарных сравнений Двасса-Стила-Кричлоу-Флигнера.

Результаты исследования. На седьмые сутки эксперимента десна приобрела цианотичный оттенок, наблюдался её значительный отек. Гистологически зафиксировано наличие пародонтального кармана, инфильтрация тканей лейкоцитами, макрофагами, фибробластами, утолщение слоя эпителия десны, разрушение периодонта и резорбция костных балок альвеол. Отмечался рост уровня цитокинов у крыс, в большей степени в сыворотке крови. Наиболее выраженный прирост зарегистрирован у TNFα и IFN γ, а минимальное увеличение отмечалось со стороны IL 6. Выявлено, что число макрофагов и B-лимфоцитов увеличилось одинаково в 8,5 раз (р=0,000001), количество Т-лимфоцитов возросло в 5,5 раз (р=0,000001).

Заключение. В модели хронического пародонтита нами показано, что наблюдается активация всех звеньев иммунной системы, с преобладанием гуморального звена иммунной системы, проявляющаяся возрастанием уровней цитокинов как в сыворотке крови, так и тканях и увеличением числа иммунокомпетентных клеток в тканях пародонта.

Список литературы
1. Richards D. Review finds that severe periodontitis affects 11% of the world population. Evid Based Dent. 2014. 15(3). 70-1. doi: 10.1038/sj.ebd.6401037.
2. Tabassum A., Madi M., Alabdulaziz A. Prevalence of periodontitis based on retrospective radiographic evaluation at dental hospital in Eastern Province of Saudi Arabia: A retrospective study. Saudi Dent J. 2022. 34(8). 788-794. doi: 10.1016/j.sdentj.2022.11.006.
3. Al-Nasser L., Lamster I.B. Prevention and management of periodontal diseases and dental caries in the older adults. Periodontol 2000. 2020. 84(1). 69-83. doi: 10.1111/prd.12338.
4. Colombo A.P., Bennet S., Cotton S.L. Impact of periodontal therapy on the subgingival microbiota of severe periodontitis: comparison between good responders and individuals with refractory periodontitis using the human oral microbe identification microarray. J Periodontol. 2012. 83(10). 1279-87. doi: 10.1902/jop.2012.110566.
5. Dahlen G., Basic A., Bylund J. Importance of Virulence Factors for the Persistence of Oral Bacteria in the Inflamed Gingival Crevice and in the Pathogenesis of Periodontal Disease. J Clin Med. 2019. 8(9). 1339. doi: 10.3390/jcm8091339.
6. Bertolini M., Costa R.C., Baro V.A.R., Cunha Villar C., Retamal-Valdes B., Feres M., Silva Souza J.G. Oral Microorganisms and Biofilms: New Insights to Defeat the Main Etiologic Factor of Oral Diseases. Microorganisms. 2022. 10(12). 2413. doi: 10.3390/microorganisms10122413
7. Pan W., Wang Q., Chen Q. The cytokine network involved in the host immune response to periodontitis. Int J Oral Sci. 2019. 11(3). 30. doi: 10.1038/s41368-019-0064-z.
8. Clark D., Radaic A., Kapila Y. Cellular Mechanisms of Inflammaging and Periodontal Disease. Front Dent Med. 2022. 3. 844865. doi: 10.3389/fdmed.2022.844865
9. Khoury W., Glogauer J., Tenenbaum H.C., Glogauer M. Oral inflammatory load: Neutrophils as oral health biomarkers. J Periodontal Res. 2020. 55(5). 594-601. doi: 10.1111/jre.12758.
10. Shahsavari M., Azizi Mazreah S., Arbabi Kalati P. Expression of mast cell in aggressive periodontitis. Minerva Stomatologica. 2020. 69(3). 127-132. DOI: 10.23736/s0026-4970.20.04269-7.
11. Yin L., Li X., Hou J. Macrophages in periodontitis: A dynamic shift between tissue destruction and repair. Jpn Dent Sci Rev. 2022. 58. 336-347. doi: 10.1016/j.jdsr.2022.10.002
12. Han Y.K., Jin Y., Miao Y.B., Shi T., Lin X.P. CD8+ Foxp3+ T Cells Affect Alveolar Bone Homeostasis via Modulating Tregs/Th17 During Induced Periodontitis: an Adoptive Transfer Experiment. Inflammation. 2018. 41(5). 1791-1803. doi: 10.1007/s10753-018-0822-7.
13. Brtov J., Krtk-Opatrn Z., Prochzkov J., Krejsa O., Duskov J., Mrklas L., Tlaskalov H., Cukrowsk B. Th1 and Th2 cytokine profile in patients with early onset periodontitis and their healthy siblings. Mediators Inflamm. 2000. 9(2). 115-20. doi: 10.1080/096293500411587.
14. Song L., Tan J., Wang Z., Ding P., Tang Q., Xia M., Wei Y., Chen L. Interleukin17A facilitates osteoclast differentiation and bone resorption via activation of autophagy in mouse bone marrow macrophages. Mol Med Rep. 2019. 19(6). 4743-4752. doi: 10.3892/mmr.2019.10155.
15. Cavalla F., Hernndez M. Polarization Profiles of T Lymphocytes and Macrophages Responses in Periodontitis. Adv Exp Med Biol. 2022. 1373. 195-208. doi: 10.1007/978-3-030-96881-6_10.
16. Кривошеева Е.М., Фефелова Е.В., Сепп А.В. и др. Эффективность адаптогенов при экспериментальном пародонтите на фоне гипергомоцистеинемии. Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. 2010. 3(73). С. 221-225.
17. Bancroft J.D.; Gamble M. Theory and Practice of Histological Techniques; Elsevier Health Sciences: Amsterdam, The Netherlands, 2008; Immunohistochemical techniques; pp. 433–472.
18. Пинелис И.С., Пинелис Ю.И., Малежик М.С., Ушницкий И.Д. Показатели врожденного и адаптивного иммунитета при хроническом генерализованном пародонтите у больных пожилого и старческого возраста. Якутский медицинский журнал. 2020. 1 (69). 63-67. doi: 10.25789/YMJ.2020.69.15
19. Chen M.L., Sundrud M.S. Cytokine Networks and T-Cell Subsets in Inflammatory Bowel Diseases. Inflamm Bowel Dis. 2016. 22(5). 1157-67. doi: 10.1097/MIB.0000000000000714.
20. Jagannathan M., Hasturk H., Liang Y., Shin H., Hetzel J.T., Kantarci A., Rubin D., McDonnell M.E., Van Dyke T.E., Ganley-Leal L.M., Nikolajczyk B.S. TLR cross-talk specifically regulates cytokine production by B cells from chronic inflammatory disease patients. J Immunol. 2009. 183(11). 7461-70. doi: 10.4049/jimmunol.0901517.
Resume

The purpose of the study: to evaluate the morphological and immunohistochemical parameters of the rat periodontium in the model of experimental periodontitis.

Materials and methods. Experimental periodontitis was formed in male Wistar rats aged 18–20 weeks and weighing 200–300 g. Periodontitis was modeled by detaching the gums with the end of a spear-shaped scalpel (No. 11) in combination with injections of 10% ethanol solution with 0.25% novocaine solution in within 7 days. The inflammatory process was assessed morphologically and histologically. In blood serum and homogenate of periodontal tissues, the level of cytokines was determined using a multiplex analysis system (USA). Histological sections were made at the level of the incisors of both jaws, stained with hematoxylin-eosin and immunohistochemically with rabbit monoclonal antibodies (SP7). Statistical data processing was carried out using one-way Kruskal-Walliss analysis of variance. Significance of differences between groups (p) was assessed using pairwise comparisons of Dwass-Steele-Critchlow-Fligner.

Research results. On the seventh day of the experiment, the gum acquired a cyanotic hue, its significant edema was observed. Histologically, the presence of a periodontal pocket, infiltration of tissues with leukocytes, macrophages, fibroblasts, thickening of the gingival epithelium, destruction of the periodontium and resorption of the bone beams of the alveoli were recorded. There was an increase in the concentrations of cytokines in rats, to a greater extent in the blood serum. The most pronounced increase was in TNFα and IFN γ, the minimum increase was observed in IL 6. It was found that the number of macrophages and B-lymphocytes increased equally by 8.5 times (p=0.000001), the number of T-lymphocytes increased by 5.5 times (p=0.000001).

Conclusion. In the model of chronic periodontitis, we have shown that there is activation of all parts of the immune system, with a predominance of the humoral part of the immune system, manifested by an increase in the levels of cytokines both in blood serum and tissues and an increase in the number of immunocompetent cells in periodontal tissues.

References
Автор 1Фефелов Александр Александрович
Автор 2Баясхаланова Цындыма Болотовна
Автор 3Терешков Павел Петрович
Автор 4Фефелова Елена Викторовна
Автор 5Цыбиков Намжил Нанзатович