Резюме

Фадеева Т.В. ¹, Шурыгина И.А. ¹, Дремина Н.Н. ¹,

Ветохина А.В. ², Чепурных Е.Е. ¹, Шурыгин М.Г. ¹

БАКТЕРИАЛЬНАЯ ТРАНСЛОКАЦИЯ

ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПЕРИТОНИТЕ

¹ Федеральное государственное бюджетное научное учреждение

«Иркутский научный центр хирургии и травматологии»

664003, г. Иркутск, ул. Борцов Революции, 1, Россия

² Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Иркутская ордена

«Знак почёта» областная клиническая больница»

664079, г. Иркутск, мкр. Юбилейный, 100

Цель исследования. Оценить значимость бактериальной транслокации при перитоните в экспе-рименте.

Материалы и методы. Моделирование перитонита проводили с использованием крыс породы Вистар (самцы) (20 животных) двукратным введением в брюшную полость смеси E. coli БЛРС и B. fragilis (зарегистрирован в Genbank, PRJNA485001), выделенных нами от больных острым аппендицитом, по 0,6 млрд микробных тел/мл в верхний и нижний этаж брюшной полости. Выведение из эксперимента осуществляли на 12 часов, 1, 3 и 7 суток. Проводили гистологическое исследование образцов тонкого кишечника и бактериологические исследования экссудата из брюшной полости (на 3-и, 7-е сутки). Бактериологический метод включал аэробную и анаэробную технику культивирования, выделение, количественное определение, идентификацию аэробных и анаэробных микроорганизмов и определение их чувствительности к антимикробным препаратам с использованием высокоселективных сред, диагностических экспресс-тестов и полуавтоматического микробиологического анализатора «ATB Expression» (bioMrieux, Франция).

Результаты. Установлено, что у всех животных развивался перитонит с прогрессированием гнойно-деструктивных изменений в стенке кишки. На 3-и сутки инфицированность экссудата выявлена в 100% наблюдений – E. coli БЛРС выделены во всех случаях в концентрациях 10⁵–10⁶ КОЕ/мл, B. fragilis – в 20% в концентрации 10⁵ КОЕ/мл. На 7-е сутки – только E. coli БЛРС в концентрациях 10³–10⁴ КОЕ/мл. Кроме того, в экссудате выявлены штаммы нормальной микрофлоры просвета кишечника: на 3-и сутки в 60% обнаружен Enterococcusfaecalis (10⁴–10⁵ КОЕ/мл), Lactobacillus ssp. (10⁴ КОЕ/мл). На 7-е сутки в 20% обнаружен Actinomycesspp.

Заключение. Нами воспроизведена модель перитонита с применением наиболее ревалентных госпитальных штаммов. Главной причиной бактериальной транслокации при экспериментальном перитоните мы считаем нарушение проницаемости эпителиального кишечного барьера, что подтверждено микробиологическими и морфологическими данными.

Ключевые слова: бактериальная транслокация, перитонит, экспериментальные животные, B. fragilis, E. coli.

Fadeeva T.V.¹, Shurygina I.A. ¹, Dremina N.N.¹, Vetokhina A.V.², Chepurnykh E.E.¹, Shurygin M.G.¹

BACTERIAL TRANSLOCATION IN EXPERIMENTAL PERITONITIS

¹ Irkutsk Scientific Centre of Surgery and Traumatology, ul. BortsovRevolyutsii 1,

Irkutsk 664003, Russian Federation

² Irkutsk Regional Clinical Hospital, Yubileyniy 100, Irkutsk 664079, Russian Federation

The aim of the research. To evaluate the significance of bacterial translocation in peritonitis in the experiment.

Materials and methods. Simulation of peritonitis was performed using Wistar rats (males) (20 animals) by double injection into the abdominal cavity of a mixture of E. coli ESBL (extended-spectrum beta-lactamase) and B. fragilis (registered in Genbank, PRJNA485001), we isolated from patients with acute appendicitis. The injections were made into upper and lower floors of the abdominal cavity – 0.6 billion microbial bodies/ml in each. The animals were sacrificed in 12 hours, 1, 3 and 7 days. On the 3^rd and 7^thdays we conducted histological examination of samples of the small intestine and bacteriological examination of exudate from the abdominal cavity. The bacteriological method included aerobic and anaerobic cultivation techniques, isolation, quantification, identification of aerobic and anaerobic microorganisms and determination of their sensitivity to antimicrobial drugs using high-selective media, rapid diagnostic tests and the semi-automatic microbiological analyzer ATB Expression (bioMrieux, France).

Results.It has been established that all animals developed peritonitis with the progression of purulent-destructive changes in the intestinal wall. On the 3^rd day, exudate infection was detected in 100% of cases – E. coli ESBL were isolated in all cases at concentrations of 10⁵–10⁶ CFU/ml, B. fragilis – in 20% at concentration of 10⁵ CFU/ml. On the 7^th day, only E. coli ESBL was found in concentrations of 10³–10⁴ CFU/ml. In addition, the exudate revealed strains of the normal microflora of the intestinal lumen: on the 3^rd day, in 60% of cases we found Enterococcus faecalis (10⁴–10⁵ CFU/ml), Lactobacillus ssp. (10⁴ CFU/ml). On the 7^thdayActinomyces spp. was detected in 20%.

Conclusion.We reproduced the model of peritonitis with the use of the most critical hospital strains. We believe that the main cause of bacterial translocation in experimental peritonitis is a violation of the permeability of the epithelial intestinal barrier, as confirmed by microbiological and morphological data.

Keywords: bacterial translocation, peritonitis, experimental animals, B. fragilis, E. coli