Резюме

Паршина А.А., Цыбиков Н.Н.

ВЛИЯНИЕ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛОВУШЕК

НА КОАГУЛЯЦИОННЫЙ ГЕМОСТАЗ И ФИБРИНОЛИЗ У ПАЦИЕНТОВ

СО ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего образования «Читинская государственная медицинская академия»

Министерства здравоохранения Российской Федерации; 672000 г.Чита, ул. Горького, 39А

Цель. Исследование влияния нейтрофильных внеклеточных ловушек на плазменный гемостаз, фибринолиз, а также количество тканевого фактора и нейтрофильной эластазы у пациентов со злокачественными новообразованиями толстого кишечника in vitro.

Материалы и методы. Из цельной венозной крови созданы экспериментальные in vitro модели интактных и стимулированных к нетозу нейтрофилов суспендированных в аутоплазме. Для каждой модели оценивали коагуляционные параметры, фибринолитический потенциал, а также уровень тканевого фактора и нейтрофильной эластазы. Исследования проведены с использованием методов регистрации пространственного роста фибринового сгустка, фибриновых пластин по Аструпу и метода ELISA.

Результаты. Зарегистрировано состояние гиперкоагуляции различной степени выраженности как для группы контроля, так и для пациентов; при этом влияние активированных нейтрофилов на свойства плазмы неодинаковы у доноров и пациентов. Фибринолитическая активность как интактных, так и активированных нейтрофилов выше в группе больных. Не наблюдалось прямой зависимости между параметрами коагуляции и уровнем тканевого фактора и нейтрофильной эластазы в исследованной плазме.

Заключение. Нейтрофильные внеклеточные ловушки, взаимодействуя с плазменными и клеточными компонентами гемостаза, способствуют, с одной стороны, их локализации в месте тромбообразования, с другой - интенсифицируют последующий фибринолиз. У лиц с онкопатологией существует хроническое состояние гиперкоагуляции, даже при нормальных показателях стандартной коагулограммы, что подтверждается проведенным исследованием и клиническими наблюдениями. При этом различия между контрольным образцом плазмы и экспериментальным in vitro-образцом нетоза минимальные, что позволяет говорить о высоком уровне продукции NETs in vivo, об измененном ответе нейтрофилов пациентов на индуктор и о существовании дополнительных, независимых от нетоза, факторов, обеспечивающих поддержание гиперкоагуляции.

Ключевые слова: нейтрофильные внеклеточные ловушки, тканевой фактор, тромбодинамика, онкопатология, иммунотромбоз

Parshina A. A., Tsybikov N. N.

NEUTROPHIL EXTRACELLULAR TRAPS` IMPACT ON PLASMA CLOTTING

AND FIBRINOLYSIS IN COLON CANCER PATIENTS IN VITRO.

Chita state medical academy, 39A Gorky st., Chita, Russia, 672090, e-mail: pochta@chitgma.ru

The aim of the study. We aimed to assess NETs affect on plasma coagulation/fibrinolysis processes and to determine tissue factor and neutrophil elastase plasma levels in colon cancer patients in vitro.

Materials and methods. We used experimental in vitro models of isolated intact and PMA-activated (NETotic) neutrophils suspended in autoplasma. Coagulation properties, fibrinolytic potential, levels of tissue factor and neutrophil elastase were measured in each sample. The study was performed using methods of spatiotemporal dynamics of a fibrin clot formation, Astrup`s fibrin plates and ELISA (for quantitative analysis).

Results. Hypercoaguability state of varying degrees was observed in both control and patients groups, however activated cells impact on indicated parameters proved to be different in patients and in healthy volunteers. Fibrin plates lysis area was the largest in both intact and activated patients neutrophils when comparing with control. We did not observe significant dependence between tissue factor or elastase levels shifts and thrombodynamics parameters in tested plasma samples.

Conclusion. NETs could interact with cellular and plasma-derived components of haemostatic system thus localizing them in the sites of thrombus formation and facilitating subsequent fibrinolysis. There is chronic hypercoaguability state in cancer patients even with normal standart coagulation tests, that was confirmed by the given experiment and corresponds clinical observations. The absence of significant difference between NETs- and control-plasma samples suggests high in vivo netosis level, impaired neutrophils PMA-response and the influence of supplementary, NETs- level independend factors providing hypercoaguability in cancer patients.

Key words: neutrophil extracellular traps, tissue factor, thromdynamics, cancer, immunothrombosis.